Jumat, 11 Juli 2008

Pemurnian enzim kolesterol oksidase dari Pseudomonas putida

di 15.05
358 photo banner300x250-biru.gif
Analisis secara enzimatis merupakan cara terbaik untuk mendeteksi kadar kolesterol dalam darah, karena bersifat lebih spesifik dibanding analisis kimia dan hasil dapat diperoleh dalam waktu relatif cepat. Agar hasil dapat dicapai secara cepat dan akurat maka dibutuhkan enzim dengan aktivitas dan spesifisitas tinggi. Untuk itu diperlukan suatu teknik permurnian untuk memperoleh enzim murni. Pemurnian enzim kolesterol oksidase dalam penelitian ini dilakukan dengan menggunakan kolom kromatografi penukar ion, yaitu DEAE Toyopearl. Hasil yang diperoleh, enzim kolesterol oksidase menunjukkan dua karakter yaitu terikat dan tidak terikat kolom DEAE Toyopearl. Dari pengujian dengan SDS PAGE diperoleh bahwa enzim kolesterol oksidase terikat kolom mempunyai pita protein tunggal dengan BM32,3kDA, sedangkan enzim tidak terikat kolom mempunyai dua pita protein, masing-masing 29,5 dan 26,3 kDA. Karakterissasi enzim terikat kolom menunjukkan bahwa enzim tersebut mempunyai aktivitas optimal pada pH 8,0 dan suhu 370C.